Цитология

Процедура созревания ооцитов in vitro (in vitro maturation, IVM) включает аспирацию ооцитов, находящихся на стадии профазы I мейоза, в составе ооцит-кумулюсных комплексов из небольших антральных фолликулов и их последующее созревание до стадии метафазы II в лабораторных условиях. IVM является перспективным методом получения ооцитов на стадии метафазы II (MII-ооцитов) в тех случаях, когда проведение гормональной стимуляции яичников нежелательно или невозможно. В то же время по темпам созревания и способности к развитию ооциты, полученные в результате процедуры IVM, уступают ооцитам, полученным в стимулированных циклах, поэтому актуальной проблемой является совершенствование протоколов IVM. В обзоре рассмотрены возможности процедуры IVM в контексте ключевых этапов созревания ооцитов и достижения ими ядерной и цитоплазматической зрелости. Освещены преимущества и недостатки различных методик IVM и основные направления их дальнейшего совершенствования.

Исследована ультраструктура митохондрий эндокриноцитов эпителия слизистой оболочки двенадцатиперстной и ободочной кишки крыс при однократном и хроническом введении мелатонина. В цитоплазме 95—90 % эндокринных клеток при введении мелатонина выявлено уменьшение числа митохондрий, их набухание (85 % органелл), фрагментирование крист (у 70 % органелл), просветление матрикса (5 % органелл) и появление миелиноподобных структур (1—2 % органелл). Обнаруженные структурные изменения, возможно, свидетельствуют о повышении метаболической активности эндокриноцитов эпителия в ответ на экспериментальное воздействие.

Несмотря на ключевую роль примордиальных зародышевых клеток (ПЗК) в направленном изменении генома, существуют значительные трудности с эффективностью их выделения. В настоящей работе представлен новый метод (in ovo — внутри яйца) выделения из эмбриональной крови генофондных пород кур, который имеет важное значение для сохранения генетических ресурсов птиц и создания новых инновационных инструментов в области биотехнологии. ПЗК выделяли из крови эмбрионов кур различных пород (5 пород, 192 четырехсуточных эмбриона) и далее оценивали способность их к культивированию в течение 20 сут. Для анализа эффективности метода были проведены эксперименты по отбору проб крови у 192-х эмбрионов исследуемых пород кур и дальнейшее культивирование ПЗК. Результаты оценивали с применением однофакторного дисперсионного анализа ANOVA. Выявлено, что эффективность отбора образцов зависит от массы яйца и породы. Самый высокий показатель эффективности выделения ПЗК демонстрировали яйца китайской шелковой породы (89.5 %). Анализ данных культивирования ПЗК показал увеличение пролиферации клеток к 20-м сут. Наибольшую выживаемость наблюдали у китайской шелковой породы (69.1±2.56 %), у кур пород царскосельская (68.78±3.39 %) и род-айленд (67.9±2.2 %). Результаты показали пригодность метода in ovo для выделения ПЗК из 4-суточных эмбрионов кур и его большую эффективность, в отличие от методов, описанных в литературе.